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豬藍(lán)耳病抗體試劑盒注意事項(xiàng)
試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2~8℃。 不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。 底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性,使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。 TMB(底物B液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。 檢測(cè)板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2~8℃)。 所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。 嚴(yán)格遵守操作說(shuō)明可以獲得*的結(jié)果。操作過(guò)程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過(guò)程必須精確。 血清稀釋板為一次性用品,不得重復(fù)使用;血清稀釋板的*容量為300μl/孔。
豬藍(lán)耳病抗體試劑盒操作步驟
取預(yù)包被的檢測(cè)板(根據(jù)樣品*,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔,取陰性及陽(yáng)性對(duì)照各100μl
分別加入反應(yīng)孔中,空白對(duì)照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。
蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔(約350μl),靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。 每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌3次, 方法同2。切記*在干凈吸水紙上拍干。 每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。 每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。
結(jié)果判定
以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(630nm作參比波長(zhǎng))讀取吸光度A值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔A450值大于或等于0.5,陰性對(duì)照孔A450值必須小于0.15。如果試驗(yàn)無(wú)效,試驗(yàn)中的操作值得懷疑,試驗(yàn)應(yīng)重做,并仔細(xì)檢察各組分。
樣品A450值大于0.15+陰性對(duì)照孔均值,判為陽(yáng)性;樣品A450值小于0.15+陰性對(duì)照孔均值,判為陰性;如陰性對(duì)照孔均值小于0.05按0.05計(jì)算。
貯存方法: 2 - 8oC下貯存。
有效期: 12個(gè)月。
豬藍(lán)耳病又稱“豬繁殖與呼吸障礙綜合征”,是由豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒引起,以成年豬生殖障礙、早產(chǎn)、流產(chǎn)和死胎,以及仔豬呼吸異常為特征的傳染病,是一種免疫抑制病,常常繼發(fā)其他病原感染。
世界上許多國(guó)家和地區(qū)都發(fā)生過(guò)豬藍(lán)耳病。該病于上世紀(jì)90年代中期傳入中國(guó),世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病,中國(guó)列為一類動(dòng)物疫病。
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