牛結(jié)核病抗體快速檢測卡采用膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成,樣本加入到加樣孔后與膠體金標記物一起沿層析膜移動,若樣本中存在牛結(jié)核病抗體則與膠體金標記物及檢測線上的抗原結(jié)合而顯示紫紅色,若樣本中不存在牛結(jié)核病抗體則不產(chǎn)生顏色反應。
牛結(jié)核病抗體快速檢測卡樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。牛結(jié)核病抗體快速檢測卡檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
牛結(jié)核病抗體快速檢測卡試驗方法:
血清/全血加樣方式:撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上,使用袋內(nèi)吸管取1滴血清或全血緩慢滴加到加樣孔內(nèi),再滴加2滴稀釋液到加樣孔。
2.室溫下放置,10分鐘內(nèi)判斷結(jié)果,10分鐘后的顯色結(jié)果無效。
1.陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2.陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線??贵w滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3.無效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色線。