弓形蟲抗體快速檢測(cè)卡的檢測(cè)原理一文科普
弓形蟲病毒主要表現(xiàn)為發(fā)熱,厭食,精神沉郁,嚴(yán)重的犬出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、糞便中混有血液、沾液、咳嗽、眼、有分泌物,呼吸困難,可視粘膜蒼白;有的出現(xiàn)虹膜炎,甚至失明。弓形蟲在貓的腸道內(nèi)通過有性繁殖和配子繁殖,發(fā)育成卵囊后隨糞便排出體外。在適宜的條件下,經(jīng)過孢子化,發(fā)育成有感染力的孢子化卵囊。卵囊被健康犬、貓吞食后,在腸道內(nèi)逸出,隨著血液循環(huán)進(jìn)入機(jī)體各組織,侵入細(xì)胞內(nèi)迅速分裂增殖,開成細(xì)胞內(nèi)假囊,引起臨床癥狀。
犬弓形蟲抗原檢測(cè)卡以雙抗體夾心法為基礎(chǔ),采用膠體金免疫層析技術(shù),快速檢測(cè)犬弓形蟲病毒抗原。
犬弓形蟲抗原檢測(cè)卡的操作方法:
1、采集全血分離血清(2000-3000轉(zhuǎn)/分離心5-15分鐘,或4℃過夜自然析出),或采用加抗凝劑的全血作為檢測(cè)樣本。也可采用不加抗凝劑的全血,但必須立即進(jìn)行檢測(cè)。
2、撕開鋁箔包裝袋,取出檢測(cè)卡,放于平整、干凈的臺(tái)面上。
3、采用配套吸管吸取已采集的樣本,緩慢、逐滴的準(zhǔn)確滴加3滴到有“S”標(biāo)記的加樣孔內(nèi)。
4、室溫下放置10-20分鐘判斷結(jié)果,超過20分鐘結(jié)果無效。
弓形蟲抗體快速檢測(cè)卡結(jié)果判定:
陽性:在觀察孔內(nèi),檢測(cè)線區(qū)(T)及對(duì)照線區(qū)(C)同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線。弓形蟲抗體滴度越高,檢測(cè)線(T)顏色越深。
陰性:在觀察孔內(nèi),只有對(duì)照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
失效:在觀察孔內(nèi),對(duì)照線區(qū)(C)和檢測(cè)線區(qū)(T)都不出現(xiàn)色線;或僅檢測(cè)線區(qū)(T)出現(xiàn)色線。
犬弓形蟲抗原檢測(cè)卡注意事項(xiàng):
1、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑;
2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉;
3、板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值;
4、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用;
5、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果;
6、在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品;
7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上;
8、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性;
9、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。