豬細(xì)小抗體檢測卡采用了快速免疫層析檢測技術(shù),用于檢測全血、血清中的細(xì)小病毒抗體。把樣本加入到加樣孔后,與膠體金標(biāo)記的PPV抗原一起沿層析膜移動。若樣品中存在抗PPV抗體時,與檢測線上的抗原結(jié)合而顯示酒紅色。如果樣品中不存在PPV抗體時,則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
【原 理】
豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒由預(yù)包被豬細(xì)小病毒抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬細(xì)小病毒抗體。實驗時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬細(xì)小病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬細(xì)小病毒抗體。
【組份】1快速檢測卡50個2吸管50個3抗體滴度比色卡1張4一次性衛(wèi)生手套1包5說明書1份
【操作方法】1.采集全血分離血清(2000-3000轉(zhuǎn)/分離心5-15分鐘,或4℃過夜自然析出),或采用加抗凝劑的全血作為檢測樣本。也可采用不加抗凝劑的全血,但必須立即進(jìn)行檢測。
2.撕開鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、干凈的臺面上。
3.采用配套吸管吸取已采集的樣本,緩慢、逐滴的準(zhǔn)確滴加3滴到有“S”標(biāo)記的加樣孔內(nèi)。
4.室溫下放置10-20分鐘判斷結(jié)果,超過20分鐘結(jié)果無效。
【結(jié)果判定】1.陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線(圖一)。細(xì)小病毒抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
2.弱陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線,但檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)的顏色很淺。
3.陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
4.失效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)和檢測線區(qū)(T)都不出現(xiàn)色線;或僅檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)色線。