豬瘟抗體快速檢測卡采用免疫原理和膠體金免疫層析技術(shù)制成,用于快速檢測豬血液或豬血清中的豬瘟抗體,為國內(nèi)最新檢測試劑。檢測時(shí)間僅需20 分鐘,操作簡便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確、直觀、靈敏度高、容易判定。當(dāng)豬瘟抗體滴度達(dá)到能抵御豬瘟強(qiáng)毒攻擊時(shí),在檢測區(qū)和對(duì)照區(qū)各形成一條色線,則視為陽性,抗體滴度越高,檢測線顏色越深;當(dāng)豬瘟抗體滴度達(dá)不到抵御豬瘟強(qiáng)毒攻擊的抗體滴度時(shí),只在對(duì)照區(qū)形成一條色線,則視為陰性。本卡附帶一張金標(biāo)試紙與正相間接血凝試驗(yàn)實(shí)物參照?qǐng)D,將檢測線的顏色深淺與參照?qǐng)D對(duì)照,便可粗略估計(jì)樣品抗體的滴度。
豬瘟抗體快速檢測卡使用樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。