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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
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更新時間:2022-03-31
簡要描述:
狂犬病毒抗體檢測試劑盒采用阻斷ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被狂犬病毒抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過溫育后,若樣品中含有狂犬病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)的抗狂犬病毒單抗,樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結(jié)合;經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍(lán)色信號與樣本中的抗體含量成反比,加入終止液
狂犬病毒抗體檢測試劑盒
狂犬病毒(Rabies virus, RBV)抗體檢測試劑盒用于檢測貓、犬等動物血清中的狂犬病毒抗體,用于評估狂犬病毒疫苗免疫狀況。
狂犬病毒抗體檢測試劑盒采用阻斷ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被狂犬病毒抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過溫育后,若樣品中含有狂犬病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)的抗狂犬病毒單抗,樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結(jié)合;經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍(lán)色信號與樣本中的抗體含量成反比,加入終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀450nm波長測定反應(yīng)孔中的吸光度A值。
組份
1 | 抗原預(yù)包被板條 | 1/2塊 | 6 | 終止液 | 11ml |
2 | 酶結(jié)合物 | 11/22ml | 7 | 陰性對 照 | 1/2ml |
3 | 10倍濃縮洗滌液 | 100ml | 8 | 陽性對 照 | 0.5ml/1ml |
4 | 顯色液 | 11/22ml | 9 | 封板膜 | 2/4張 |
5 | 樣本稀試液 | 100ml | 10 | 說明書 | 1份 |
需自備的設(shè)備及試劑
1. 微量移液器:10μl-100μl、100μl-1000μl。
2. 一次性移液器吸頭。
3. 量筒:500ml。
4. 96孔板酶標(biāo)儀。
5. 蒸餾水或去離子水。
6. 洗瓶或洗板機(jī)。
樣品制備
取動物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。
洗滌液的準(zhǔn)備
濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫,如有鹽結(jié)晶,搖動使結(jié)晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。
注意事項
1. 試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,應(yīng)將試劑盒各組份放置室溫至少1小時以上。使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2-8℃。
2. 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應(yīng)防止試劑污染。
3. 終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應(yīng)該注意防護(hù)。
4. TMB(顯色液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。
5. 檢測板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃)。
6. 所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。
7. 嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得*的結(jié)果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。
8. 抗原包被板為一次性用品,不得重復(fù)使用;
操作步驟
1. 每次試驗均設(shè)置陽性對照1孔、陰性對照2孔,陰、陽性對照不用稀釋,直接取100ul加入反應(yīng)孔。
2. 將樣品稀釋液按90ul/孔加入到微孔反應(yīng)板內(nèi),之后將待檢樣品血清按10ul/孔加入孔內(nèi)并吹打混勻(移液器槍頭請勿混用);
3. 蓋上封板膜(可按實際需要自行裁剪),置37℃溫育60分鐘。
4. 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內(nèi)液體,以上步驟重復(fù)4-6次,*在干凈吸水紙上拍干。
5. 每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
6. 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6次, 方法同4。切記*在干凈吸水紙上拍干。
7. 每孔加顯色液100μl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色15分鐘。
8. 每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。
結(jié)果判定
用酶標(biāo)儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度OD值。
試驗成立的條件是:
陰性對照(N)OD值>0.5,同時陽性對照(P)阻斷率>50%;
計算方法:
PI (阻斷率)= 1 —(樣品OD值 ÷ 陰性O(shè)D均值)
陰陽性判斷:
PI(阻斷率)>40%則判斷為陽性;
PI≤40%則判斷為陰性。
注:(PI=40%相當(dāng)于抗體滴度0.5IU/ml)
有效期
貯存方法: 2 - 8oC下貯存。
有效期: 12個月。
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